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山東深析生物科技有限公司
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NanoImager 單分子成像與功能分析系統

單分子成像與功能分析系統,隨時隨地使用超高分辨成像技術解決您的科學問題,就是如此簡單,全球第一臺桌面式超高分辨率顯微成像系統。
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單分子成像與功能分析系統
隨時隨地使用超高分辨成像技術解決您的科學問題,就是如此簡單
全球第一臺桌面式超高分辨率顯微成像系統

 


 

Nanoimager技術特征

 

全方位超分辨率成像技術

精準設計

集成性分析

Laser kept in,light kept out

驚人的大視野

四個熒光通道,可兩個同時成像


 

應用領域

單分子示蹤

單分子成像

蛋白質相互作用

蛋白質組裝

表觀遺傳學

DNA納米定位

單分子定位

單分子FRET

外泌體


 

Nanoimager顯微鏡設計

◆ Nanoimager具有和傳統顯微鏡不同的特殊設計。傳統顯微鏡需要集成單分子檢測功能的配件,同時也會帶來配件的限制性,而Nanoimager是專門為單分子超分辨成像而設計,為了達到更高的效率而移除了多余的成像元件;

◆ 配置更加安全的一級激光,Nanoimager可在任何辦公室、實驗室和教室使用。相對于放置于暗室的大型顯微鏡, Nanoimager更加方便用戶的使用;

◆ Nanoimager的顯微鏡單位面積小于A4紙;配套的激光器通過光纖連接至顯微鏡;

◆ 與定制的顯微鏡和傳統的顯微鏡設計不同, Nanoimager始終保持校準狀態。樣品準備好后可以直接成像,無需花費時間進行調試和校正。

◆ Nanoimager的封閉式系統能夠防止偏移發生并阻止灰塵和其他污染物進入,可以一直保持在正常工作狀態。作為一款臺式機, Nanoimager不需要傳統顯微鏡昂貴的配套設施,無需額外配置溫控房間、光學平臺、激光室或暗室。

 


 

Nanoimager技術原理

Nanoimager采用PALM/dSTORM技術,利用單分子定位算法并結合光學系統艾里斑的形狀,以超高精度(納米量級)獲得熒光分子的中心位置,然后用CCD將其信號進行采集轉化后得到分辨率為20nm的超分辨圖像。

 


 

成像模式

 

1、 單分子FRET
Nanoimager是世界第一臺用于大視野單分子熒光共振能量轉移(smFRET)的商業化儀器。 FRET是一種兩個熒光分子間非輻射性的能量轉移方式,反映兩者的分子間距。 FRET一般在2 – 10 nm的間距發生。 smFRET研究中,作為供體的熒光分子由激光激發,將能量轉移至臨近的受體熒光分子。被激發的受體將能量以熒光形式發散。供體與受體可以連接至同一個或者不同的分子。
smFRET可以用于測量核酸或者單個蛋白分子的分子內距離,也可以用于研究蛋白亞基間的相互作用;還可應用于研究藥物對于酶結合位點的構象動力學的作用,或是神經退行性疾病中蛋白的聚集。 smFRET可以用于在單分子層面推到結合常數、反應途徑與停滯時間而不受總體平均值干擾。 Nanoimager適用于smFRET的關鍵功能包括:同時雙色成像;單分子散射光強度和總體平均的實時分析;視野中數千個單分子的高通量成像,以及用交替熒光激發 (ALEX) smFRET的功能來定量化學計量與FRET效率。圖4是smFRET用于研究單個DNA霍利迪交叉的動力學。

 


 

2、 單分子示蹤FRET
Nanoimager可以在兩個通道同時示蹤細胞或者純化物樣品中的單分子 (圖5),并計算擴散系數。細胞中分子的擴散系數可以被示蹤,如酶或蛋白可以通過藥物和抗生素的反應來示蹤。低擴散率可以表示標記分子與另一分子或結構的相互作用或相結合。同時示蹤兩種標記了不同熒光分子的分子可以確定兩者動態相互作用的水平。
Nanoimager可以直接反映純化樣品中熒光粒子的擴散率和預估大小,具有敏感性 (單熒光分子級別) 和特異性 (雙色標記可以顯著降低檢測雜質的可能性)。

 


 

3、 使用Nanoimager成像—更大的視野
Nanoimager的每個成像通道均有50 μm x 80 μm的大視野,而其他大部分單分子顯微設備只有20μm x 20 μm的視野。視野中照明均勻,可以實現單分子或細胞的高通量成像并快速收集數據。
下圖顯示了以10倍于其他技術的速度對突變的大腸桿菌細胞的不同表型進行成像。為了獲得不同表型的可靠的結果,需要對大量細胞進行比較。使用具有大視野,能夠自動對焦和自動獲取數據的Nanoimager可以顯著加快整個實驗速度和通量。將大視野與超分辨成像結合是Nanoimager的獨特優勢。

 

 

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發布時間:2021-08-24 22:33:59

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